Rôle des protéines secrétées par le TPS dans la virulence bactérienne
- Authors
- Publication Date
- Nov 06, 2023
- Source
- HAL-Descartes
- Keywords
- Language
- French
- License
- Unknown
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Abstract
Pseudomonas aeruginosa (Pa) est un pathogène opportuniste responsable de nombreuses infections aigues et chroniques. La virulence de ce pathogène repose sur un arsenal de facteurs de virulence qui peuvent être sécrétés de différentes manières. En effet, Pa possède plusieurs systèmes de sécrétion, et ma thèse s’est focalisée sur les protéines sécrétées par le système de sécrétion à deux partenaire (TPS). Pa possède au moins cinq substrats de TPS : LepA (protéase), CdiA (inhibition de la croissance dépendante du contact), CdrA (adhésine), Exolysine ExlA (cytotoxine) et PdtA.Le premier projet porte sur l’étude de PdtA. Cette protéine appartient à la famille des adhésines de type High Molecular Weight (HMW), comme HMW1 et HMW2 de Haemophilus influenzae, connues pour leurs propriétés adhésives et immunogènes. Le gène pdtA est conservé parmi les différentes souches de Pa et des anticorps anti-PdtA ont été détectés chez des patients infectés par Pa. Cependant, son rôle exact et sa structure restent inconnus. Nous avons examiné la synthèse de la PdtA à l'aide d'anticorps polyclonaux dans une cohorte de souches cliniques. Alors que les souches de référence de laboratoire (PAO1, PA7 et PA14) ne synthétisent pas la protéine, PdtA est détectée dans plusieurs souches cliniques, indépendamment de leur appartenance phylogénique. La localisation de PdtA sur la surface de bactéries a été confirmées par immunofluorescence. Nous avons aussi montré que PdtA joue un rôle dans l'auto-agrégation bactérienne en comparant une souche clinique et les souches mutantes isogéniques ΔpdtB et ΔpdtA. Nous avons montré que plusieurs sérums de patients atteints de mucoviscidose ayant contracté une infection à Pa contenaient des anticorps anti-PdtA, en utilisant un ELISA.Un deuxième projet consistait à évaluer la relation entre la structure et la fonction de différentes protéines homologues d’ExlA chez d’autres espèces de Pseudomonas. En effet, il existe des protéines homologues à la toxine ExlA chez Pseudomonas entomophila, Pseudomonas putida et Pseudomonas chlororaphis. Nous avons montré que les différentes protéines ExlA-like diffèrent par leur fonction de cytolyse, leur liaison aux membranes et leur capacité à cliver la E-cadhérine. Ces différences sont liées aux différences de leur partie C-terminale. Cependant, nous avons montré que l’association de la partie N-terminale avec la partie C-terminale est essentielle à la fonction de la protéine en examinant la fonctionnalité de protéines hybrides.Dans l’ensemble, ce travail a permis de mieux comprendre le fonctionnement de deux facteurs de virulence de Pa et ouvre la voie pour poursuivre les recherches sur une potentielle cible thérapeutique.