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RECHERCHE DE NOUVEAUX SYSTEMES DE TRANSPORT A TRAVERS L'ENVELOPPE DU CHLOROPLASTE CARACTERISATION DE NOUVELLES PROTEINES HYDROPHOBES

Authors
  • SEIGNEURIN BERNY, DAPHNE
  • JOYARD, JACQUES
Publication Date
Jan 01, 2000
Source
OpenGrey Repository
Keywords
Language
French
License
Unknown

Abstract

DE NOMBREUX TRANSPORTEURS SONT PRESENTS DANS L'ENVELOPPE DES CHLOROPLASTES, CEPENDANT TRES PEU D'ENTRE EUX ONT ETE CARACTERISES. LA TRES FAIBLE REPRESENTATION DE CES PROTEINES ET LEUR HYDROPHOBICITE EST LA LIMITATION PRINCIPALE A LEUR CARACTERISATION. NOUS AVONS DEVELOPPE UNE NOUVELLE APPROCHE PERMETTANT L'ETUDE DE CE TYPE DE PROTEINES. ELLE REPOSE SUR LE CARACTERE HYDROPHOBE DES TRANSPORTEURS QUI PERMET DE LES SOLUBILISER DANS LES SOLVANTS ORGANIQUES COMME LE CHLOROFORME/METHANOL. LES PROTEINES EXTRAITES SONT SEPAREES PAR ELECTROPHORESE EN CONDITIONS DENATURANTES, ET ANALYSEES PAR MICROSEQUENCAGE. PLUSIEURS PROTEINES ONT ETE IDENTIFIEES DONT LES PROTEINES IE16 ET IE18. LA CARACTERISATION FONCTIONNELLE DE IE18 ET IE16 A ETE POURSUIVIE EN ANALYSANT D'UNE PART LES HOMOLOGIES DE SEQUENCES AVEC DES PROTEINES DE FONCTION CONNUE. D'AUTRE PART, NOUS AVONS OBTENU DES MUTANTS DE CYANOBACTERIES ET D'ARABIDOPSIS THALIANA DONT LES GENES CORRESPONDANTS AUX PROTEINES IE18 ET IE16 ONT ETE INTERROMPUS. LES PHENOTYPES FOURNISSENT DES INFORMATIONS SUR LA FONCTION DES PROTEINES MUTEES. DE PLUS, CES PROTEINES ONT ETE EXPRIMEES DANS DES SYSTEMES HETEROLOGUES POUR LES ANALYSES BIOCHIMIQUES ET ELECTOPHYSIOLOGIQUES QUI SONT EN COURS ACTUELLEMENT. LORS DES PREMIERS SEQUENCAGES DES PROTEINES EXTRAITES DANS LES SOLVANTS ORGANIQUES, UNE SEQUENCE CORRESPONDANT A L'ANNEXINE A ETE OBTENUE. L'ANNEXINE COPURIFIE AVEC DES CHLOROPLASTES ET DES MEMBRANES D'ENVELOPPE EN PRESENCE DE CALCIUM. LE SULFOLIPIDE, LIPIDE SPECIFIQUE DU PLASTE, EST UN SITE A HAUTE AFFINITE PERMETTANT L'INTERACTION DE L'ANNEXINE AVEC L'ENVELOPPE. LA SIGNIFICATION DE SON INTERACTION AVEC L'ENVELOPPE DU CHLOROPLASTE RESTE A ETRE DETERMINEE. L'APPROCHE QUE NOUS AVONS DEVELOPPE PEUT ETRE UTILISEE DE FACON SYSTEMATIQUE POUR L'ETUDE DES TRANSPORTS DANS DIFFERENTS SYSTEMES MEMBRANAIRES. / GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / Sudoc / Sudoc / France / FR

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