Détermination de la composition en acyles gras des glycérolipides et glycérophospholipides par techniques séparatives couplées à la spectrométrie de masse haute résolution
- Authors
- Publication Date
- Jun 12, 2023
- Source
- HAL-Descartes
- Keywords
- Language
- French
- License
- Unknown
- External links
Abstract
Les acyles gras (FAs) représentent le principal élément constitutif des lipides complexes (glycérolipides / phospholipides / sphingolipides). Leur structure varie en fonction de leur fonctionnalisation, nombre de carbones, nombre et position d'insaturations. Cette variété est à l'origine du très grand nombre d'espèces lipidiques et de la complexité de leur analyse.Les travaux menés au cours de cette thèse ont démontré, au travers de trois publications, que l'évaluation de la distribution FAs des glycérolipides et phospholipides était accessible grâce à l'intensité des ions fragments [monoacylglycérol+H- H2O]+ (ions B) produits en source APPI/APPI-HRMS, lors du couplage à la FIA ou la NPLC.Les bases de ce nouveau concept ont été posées via l'étude des triglycérides d'huiles végétales.Il a été observé que la distribution des intensités des ions B était directement reliée à la distribution des FAs, sauf pour le FA polyinsaturé C18:3.Des coefficients de pondération des intensités des ions B ont été calculés pour compenser les différences d'ionisation. Globalement, un coefficient deux fois plus important a été appliqué aux intensités des ions B(18 :3) pour compenser sa plus faible intensité.Le concept a ensuite été étendu aux phospholipides (PLs). Pour les extraits contenant uniquement des diacyl-PLs, la transposition est également directe. La nature de la tête polaire n'a pas eu d'influence sur la formation des ions B.Pour les extraits contenant à la fois des diacyl-PLs et des plasmalogènes (fonction éther vinylique) une séparation préalable doit être réalisée. En effet, la formation des ions B n'a pas lieu au même degré pour ces deux sous-classes.Une hydrolyse par des vapeurs d'acide chlorhydrique a permis de rompre spécifiquement les liaisons éthers vinyliques. Les plasmalogènes sont alors transformés en Lyso-PLs et aldéhydes.Ces extraits ont également la particularité de contenir des teneurs importantes de FAs polyinsaturées. Par analogie avec l'étude des TGs, un coefficient pondérateur de deux a été appliqué aux intensités des ions B de ces FAs.Pour accéder à la distribution des alkényls gras des plasmalogènes, un concept similaire à celui des ions B a été mis en œuvre avec succès.De plus, un schéma de fragmentation a été proposé pour les plasmalogènes PC lors de l'utilisation de la source APCI.Enfin, notre nouveau concept a été mis en œuvre sur des extraits lipidiques de souches Yarrowia Lipolytica (levure oléagineuse) modifiées pour favoriser la production de FAs à chaînes impaires. La distribution des FAs au sein de chaque classe de lipides a été évaluée et le concept a été étendu à deux autres classes de lipide (Diglycérides-DG et glucuronosyl diacylglycerol-GlcADG).
