Caractérisation de protéines thérapeutiques par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse
- Authors
- Publication Date
- Jun 14, 2022
- Source
- HAL-Descartes
- Keywords
- Language
- French
- License
- Unknown
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Abstract
Les protéines thérapeutiques occupent une place déterminante dans le traitement de pathologies graves tels les cancers, l'hémophilie ou les déficits immunitaires, et constituent souvent l'unique alternative thérapeutique disponible. La chromatographie liquide et la spectrométrie de masse constituent les méthodes de référence pour la caractérisation structurale des protéines. Cette thèse rassemble des travaux portant sur le développement de méthodes de chromatographie liquide couplées à la spectrométrie de masse pour la caractérisation de différents types de protéines thérapeutiques. La première partie des résultats décrit le développement de méthodes de chromatographie liquide de phase inverse couplées à la spectrométrie de masse pour la caractérisation de modifications post-traductionnelles d'anticorps polyclonaux, telles que l'oxydation et la glycation, et permettant l'évaluation de l'intégrité de ponts disulfures d'anticorps monoclonaux. La seconde partie présente le développement de méthodes de spectrométrie de masse native pour la caractérisation des isoformes d'anticorps monoclonaux et de l'albumine, notamment par le couplage de méthodes de chromatographie d'échanges d'ions à la spectrométrie de masse. En dernier lieu, la relation structure/fonction entre une protéine thérapeutique et un récepteur est évaluée par l'étude de l'impact des modifications post-traductionnelles de l'albumine sur son interaction au récepteur néo natal Fc et l'impact de la lysine en position C-terminale d'un anticorps monoclonal sur son interaction aux récepteurs néo natal Fc et FcγRIIIa.
