Affordable Access

Transkriptionseinfluss einer Multiconsensusregion im 5'-flankierenden Genbereich des Hepatocyte Growth Factor

Authors
Publication Date
Keywords
  • Chemistry And Allied Sciences

Abstract

Transkriptionseinfluß einer Multiconsensus- region im 5’-flankierenden Genbereich des Hepatocyte Growth Factor I n a u g u r a l - D i s s e r t a t i o n zur Erlangung des Doktorgrades der Mathematisch-Naturwissenschaftlichen Fakultät der Universität zu Köln vorgelegt von Mark-Peter Spindler aus Oldenburg Köln im Jahr 2002 Berichterstatter: Prof. Dr. H.-W. Klein Prof. Dr. J. Howard Tag der letzten mündlichen Prüfung: 21.05.2002 Inhaltsverzeichnis III Inhaltsverzeichnis INHALTSVERZEICHNIS I ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS VI 1. EINLEITUNG 1 2. MATERIAL UND METHODEN 8 2.1. MATERIAL 8 2.1.1. Plastikwaren, Verbrauchsmaterialien und Glasgeräte 8 2.1.2. Antibiotika, Chemikalien, Enzyme 8 2.1.3. Lösungen und Puffer 8 2.1.4. Antikörper 9 2.1.5. Oligonukleotide 9 2.1.5.1. Oligonukleotiddimere 9 2.1.5.2. PCR-Primer für die Klonierung der Ratten-HGF-Promotorkonstrukte 10 2.1.5.3. PCR-Primer für die Mutagenese 12 2.1.5.4. Primer und Oligonukleotide für den in-vivo-Footprint 12 2.1.6. Vektoren und Plasmide 13 2.1.7. Bakterienstämme 13 2.1.8. Zellinien 13 2.2. METHODEN 14 2.2.1. Biochemische Arbeiten 14 2.2.1.1. Isolierung von Plasmid-DNA im Mikromaßstab 14 2.2.1.2. Präparative Isolierung von Plasmid-DNA 15 2.2.1.3. Photometrische Analyse der DNA 16 2.2.1.4. Polymerase-Ketten-Reaktion 16 2.2.1.5. Enzymatische Hydrolyse mit Restriktionsendonukleasen 18 2.2.1.6. Horizontalgelelektroporese 18 2.2.1.7. Isolierung von DNA-Fragmenten aus Agarosegelen 19 2.2.1.8. Dimerisierung von Oligonukleotiden 19 2.2.1.9. Ligation von DNA-Fragmenten 20 2.2.1.10. Klonierung der HGF-Promotorfragmente aus genomischer Rattenleber-DNA 20 2.2.1.11. In-vitro-Expression von TFE3 mittels des TNT® Coupled Reticulocyte Lysate System 21 2.2.1.12. In-vitro-Expression einer trunkierten Form von USF1 mittels des pET-Systems 21 Inhaltsverzeichnis IV 2.2.2. Arbeiten mit E.Coli-Zellen 22 2.2.2.1. Kultivierung 22 2.2.2.2. Herstellung kompetenter Zellen 22 2.2.2.3. Transformation

There are no comments yet on this publication. Be the first to share your thoughts.