Affordable Access

Thermoanaerobacter brockii 由来卜レハロ一スホスホリラ一ゼおよび新規ホスホリラーゼに関する研究

Authors
Publication Date

Abstract

」ーー 氏名 学位の椅類、 学位記番日 学位授与年片 H 学位授与の要件 学{主論文名 論文審合委員 茶園↑導入 博士(理学) 第 4018 ~;- 手成1:3年9J-:l28日 学仇規則第4条第2.:頁該、sl者 一一一一一一一一一一 .1 Thermoanaerobacter brocku由来トレハロースホスホリラーゼおよび新 規ホスホリラーゼに関する研究 主査教授 信IJ土丘助教授 南浦能至 飯塚 勝 別主資教授 論文内容の要旨 谷口 誠 新規オリゴ糖の酵素的凸成を円的:こ、大崇安価に生産されるようになったトレハロースを基質にして微 生物を対象に検索したところ、嫌気性好熱薗7百erγnoa.nαeroba.cterbrucんiiATCC35047の無細胞抽山液 にトレハロースから非還)I;'t:生二三糖を牛.成する酵素系が存点することを見IUした。そこで、この非還元性三 糖の構造解析、陀びにトレハロースからの牛ー成機情、とくに、それに関与する醇素の解明及びこれら酵素を 用いた種々オリゴ糖の合成を試みた。 非単元性糖を単離、精製し、構造解析した結果、本糖質は2-0-α-D-グルコピラノシルα心ーグルコピ ラノシル α-D-グルコピラノシド (2-0-α-1)ーグルコピラノシル α, αー トレハロース)であることが分かっ た。この糖質はセラギノースと命名されている既知糖質であったが、トレハロースからのセラギノース合 成にはトレハロースホスホリラーゼと新規ホスホリラーゼとが関与していることが分かった。無細胞抽出 液からてつの酵素ーをそれぞれ精製し、性質及び基質特崇性を検討した。 T.broclui!¥TCC350打由来卜レハ ロースホスホリラーゼは、これまで知られている酵素の中で最も耐熱'附が高かったのもうーーつの酵素、新 規ホスホリラーゼは、。ーグルコースと βー グルコー スー 1-リン酸(β-G1P)とからコージビオースを生成した。 この新規ホスホリラーゼをコージビオースホスホリラーゼと命-7.,した。 トレハロースからのセラギノース 生成は、先ずトレハロースホスホリラーゼの作用によりトレハロースからグルコースと β-G1Pが生成し、 次いでコージピオースホスホリラーゼの作用により β-G1Pとトレハロースとからセラギノースが生成する という反応機構によることが明らかとなった。また、 T.brockii白米ホスホリラーゼ類を用いることにより、 ガラク卜シルグルコシド、グルコシルソルボース、グルコシルスクロース、コージオリゴ糖など、種々オ 1)ゴ糖を調製できたことから、これら酵素が新規オリゴ糖の合成に有用であることを明らかにすることが できた。 論文審査の結果の要旨 向然界に種々の二糖は数多く存在するが、それら二糖に特異的なホスホリラーゼはあまり知られていな い。また、その転移反応を利用して、新規有用オリゴ糖の酵素合成は、これまであまり試みられていない。 木論文は、'て糖特異的新規小スホリラーゼの発見とそれによる新規オリゴ糖の開発を目的とした研究を纏 めたものである。 若者lま先ず、トレハロースを唯一のjぷ京源とする培地を用いて、ホスホリラーゼを生産する微生物を検 索し、嫌気性好熱歯の l南株、 Thermuanaerobacterbrochii ATCC3504i、の無細胞抽出液がトレハロー スから非還元性三輪(セラギノース、 2-0-α-Dー グルコピラノシルα. αー トレハロース)を合成すること -U9 を発見した。セラギノースはイワヒパから単雌されている希少の既知糖質であるが、この糖の合成に関わ る酵素を無細胞仙出液から精製し、性質を詳細に検討した結果、 2種の酵素、すなわち、 つは卜レハロー スに作用してグルコースと β-G1Pを生成する酵素で、既知の酵素の中で最も耐熱性が高いトレハロースホ スホリラーゼであり、他の一つはβ-GIPとトレハロースとからセラギノースを合成する未知の酵素〈コー ジビオースホスホリラーゼと命名、コージビオースに作用してグルコースと β-G1Pを生成する酵素)であ ることを明らかにした。次いで著者は、応用研究として精製した!二記の 2種の酵素の受存体特異性を克明 にしらべ、酵素の転移反応を利用して、ガラクトシルグルコシド、グルコシルソルボース、グルコシルス クロース、コージオリゴ糖などの種々オリゴ糖の調製を試み、ホスホリラーゼがオリゴ糖合成に有用であ ることを示した。 上述の嫌に、本論文は新規二糖ホスホ IJラーゼの

There are no comments yet on this publication. Be the first to share your thoughts.